什么是牛血清白蛋白?有什么作用?
3/31/2021 1:53:07 PM
一、什么是牛血清白蛋白
牛血清白蛋白(BSA),CAS號(hào)9048-46-8,是牛血清中的一種球蛋白,包含607個(gè)氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用。
二、牛血清白蛋白的作用
牛血清白蛋白(BSA)一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中,因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环€(wěn)定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保護(hù)”或“載體”作用,不少酶類添加BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會(huì)受到什么影響。對(duì)多數(shù)底物DNA而言,BSA可以使酶切更完全,并可實(shí)現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃,酶切反應(yīng)超過(guò)1h時(shí),BSA可以使酶更加穩(wěn)定,因?yàn)樵诓缓珺SA的反應(yīng)緩沖液中,許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時(shí)間。而B(niǎo)SA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì)。
三、牛血清白蛋白的分級(jí)及選擇(牛血清白蛋白等級(jí)低到高)
1.牛血清白蛋白(等級(jí)最低的BSA),這個(gè)是普通意義上的BSA,只要主要成分是BSA的產(chǎn)品都可以成為牛血清白蛋白,所以他也涵蓋了其他等級(jí)的BSA,所以客戶要注意其純度(一般是工業(yè)生產(chǎn)用)。
2.牛血清白蛋白第五組分,這個(gè)是生物技術(shù)級(jí)的產(chǎn)品,適用范圍是最廣的,有些廠家的BSAV脂肪酸和內(nèi)毒素很低,可直接用于細(xì)胞培養(yǎng),純度高甚至可以用于任何相關(guān)實(shí)驗(yàn)(Elisa實(shí)驗(yàn),WB實(shí)驗(yàn))。
3.牛血清白蛋白(無(wú)必須脂肪酸),脂肪酸含量極低,脂肪酸含量≤0.002%(w/w),或在1%BSA溶液中脂肪酸濃度<2μmol/L(可用于測(cè)定培養(yǎng)的組織細(xì)胞釋放的游離脂肪酸濃度等)。
4.牛血清白蛋白(無(wú)蛋白酶),或者稱為無(wú)Protease牛血清白蛋白,或者稱為ProteaseFreeBSA,產(chǎn)品不含有DNAse酶、蛋白酶以及IgG(用于放射免疫、酶聯(lián)免疫以及作為稀釋劑或者封閉劑等)。
5.牛血清白蛋白(細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)),純度98%即可,但是要求脂肪酸含量和內(nèi)毒素含量極低(細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)等)。
6.牛血清白蛋白,高純度,純度99%以上(金標(biāo)級(jí),制作金標(biāo)抗體等)。
7.交聯(lián)牛血清白蛋白:冷凍干燥粉末,含單體(66000)、二聚體(132000)、三聚體(198000)、四聚體(264000)等(測(cè)定未知蛋白質(zhì)的分子量,也可用于生化教學(xué)實(shí)驗(yàn),用以摸索電泳條件、檢定電泳結(jié)果等)。
牛血清白蛋白(BSA),CAS號(hào)9048-46-8,是牛血清中的一種球蛋白,包含607個(gè)氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用。
二、牛血清白蛋白的作用
牛血清白蛋白(BSA)一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中,因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环€(wěn)定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保護(hù)”或“載體”作用,不少酶類添加BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會(huì)受到什么影響。對(duì)多數(shù)底物DNA而言,BSA可以使酶切更完全,并可實(shí)現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃,酶切反應(yīng)超過(guò)1h時(shí),BSA可以使酶更加穩(wěn)定,因?yàn)樵诓缓珺SA的反應(yīng)緩沖液中,許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時(shí)間。而B(niǎo)SA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì)。
三、牛血清白蛋白的分級(jí)及選擇(牛血清白蛋白等級(jí)低到高)
1.牛血清白蛋白(等級(jí)最低的BSA),這個(gè)是普通意義上的BSA,只要主要成分是BSA的產(chǎn)品都可以成為牛血清白蛋白,所以他也涵蓋了其他等級(jí)的BSA,所以客戶要注意其純度(一般是工業(yè)生產(chǎn)用)。
2.牛血清白蛋白第五組分,這個(gè)是生物技術(shù)級(jí)的產(chǎn)品,適用范圍是最廣的,有些廠家的BSAV脂肪酸和內(nèi)毒素很低,可直接用于細(xì)胞培養(yǎng),純度高甚至可以用于任何相關(guān)實(shí)驗(yàn)(Elisa實(shí)驗(yàn),WB實(shí)驗(yàn))。
3.牛血清白蛋白(無(wú)必須脂肪酸),脂肪酸含量極低,脂肪酸含量≤0.002%(w/w),或在1%BSA溶液中脂肪酸濃度<2μmol/L(可用于測(cè)定培養(yǎng)的組織細(xì)胞釋放的游離脂肪酸濃度等)。
4.牛血清白蛋白(無(wú)蛋白酶),或者稱為無(wú)Protease牛血清白蛋白,或者稱為ProteaseFreeBSA,產(chǎn)品不含有DNAse酶、蛋白酶以及IgG(用于放射免疫、酶聯(lián)免疫以及作為稀釋劑或者封閉劑等)。
5.牛血清白蛋白(細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)),純度98%即可,但是要求脂肪酸含量和內(nèi)毒素含量極低(細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)等)。
6.牛血清白蛋白,高純度,純度99%以上(金標(biāo)級(jí),制作金標(biāo)抗體等)。
7.交聯(lián)牛血清白蛋白:冷凍干燥粉末,含單體(66000)、二聚體(132000)、三聚體(198000)、四聚體(264000)等(測(cè)定未知蛋白質(zhì)的分子量,也可用于生化教學(xué)實(shí)驗(yàn),用以摸索電泳條件、檢定電泳結(jié)果等)。